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美鳳力臨床前大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心
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概述:目前的科學(xué)發(fā)展水平尚不能完全脫離實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行生命科學(xué)研究,尤其是涉及生物安全方面的實(shí)驗(yàn)研究。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,對實(shí)驗(yàn)室的不科學(xué)管理可導(dǎo)致病原微生物的傳播,污染室內(nèi)環(huán)境,如果實(shí)驗(yàn)室人員防護(hù)或操作不當(dāng),就會(huì)接觸到污染物而被感染。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究機(jī)構(gòu)要不斷完善檢疫制度,制訂詳細(xì)的管理措施,將實(shí)驗(yàn)和特殊微生物操作、安全性設(shè)備及單位規(guī)定的生物安全制度相結(jié)合。
概述:方法 將成年雄性 Wistar 大鼠放入氣體染毒艙內(nèi)分別暴露于 0、0. 5 和 2 ppm 臭氧 6 h。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后 24 h 麻醉大鼠,收集肺泡灌洗液并提取外泌體。 采用 miRNA-seq 技術(shù)檢測外泌體中 差異表達(dá)的 miRNA,使用 miRDB 數(shù)據(jù)庫對組間差異表達(dá) Top 10 miRNA 進(jìn)行靶基因預(yù)測,并對靶基因進(jìn)行 Gene Ontology 功能富集和 KEGG Pathway 分析。 利用 qRT-PCR 方法對表達(dá)豐度較高且組內(nèi)均一性較好的差異表達(dá) miRNA 進(jìn)行驗(yàn)證。
概述:CRISPR/Cas9系統(tǒng)自發(fā)現(xiàn)以來,得到快速發(fā)展已被廣泛應(yīng)用生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、基因治療、動(dòng)植物育種改良等領(lǐng)域【1】。基于Cas9切口酶(nCas9)與脫氨酶結(jié)構(gòu)域/糖基化酶(MPG或UNG)的融合成的堿基編輯器(ABE,CBE,gGBE,gTBE),可高效實(shí)現(xiàn)A-to-G,C-to-T,C-to-G,G-to-C/T,以及T-to-G/C的堿基替換,為糾正突變的疾病位點(diǎn)提供了精準(zhǔn)高效基因編輯工具【2-6】。然而由于Cas9的體積過大(1368個(gè)氨基酸),基于nCas9的堿基編輯器難以實(shí)現(xiàn)單個(gè)AAV(4.7kb) 的包裝遞送
概述:方法 選擇 8 周齡雄性 SD 大鼠,準(zhǔn)備所需器材及試劑。 首先將緩釋泵組裝并孵育至工作狀態(tài),然后進(jìn)行植入手術(shù)操作。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉后備 皮,手術(shù)暴露顱骨上表面,使用腦立體定位儀定位腦室正上方一點(diǎn),在該點(diǎn)用高速顱鉆鉆 1 個(gè)小孔。 先將泵體埋置 于頸部皮下,然后將針頭插入小孔中,并用牙科水泥固定,凝固后剪去針頭基座,逐層縫合皮下軟組織和頭皮,將動(dòng) 物放回籠內(nèi)單獨(dú)飼養(yǎng)。
概述:高血壓(hypertension)影響全世界約10億人,約占全球疾病負(fù)擔(dān)的4.5%。原發(fā)性高血壓是一種由遺傳、環(huán)境及行為因素共同作用的復(fù)雜性疾病,占高血壓患者的90%以上。高鹽攝入是重要的環(huán)境因素之一。血壓對鹽攝入的反應(yīng)具有顯著的個(gè)體差異,Kawasaki等和Luft等基于此先后提出了“血壓鹽敏感性”。血壓鹽敏感性也是心血管疾病的一
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