在醫學教學、科研和醫學工作中,無論是在基礎醫學、臨床醫學、預防醫學等領域,都需要進行各種動物實驗。通過對動物的觀察和分析,來研究和解決醫學上存在的許多問題,動物實驗已經成為醫學科學研究和教學工作中不可或缺的重要手段。
動物實驗方法多種多樣,但其中一些基本方法是通用的,包括動物的選擇、抓取、固定、麻醉、脫毛、給藥、采血、采尿、急救、處死、尸檢等。不論從事何種醫學研究課題,都需要掌握這些基本方法,因此,動物實驗基本方法已成為醫學科技工作者必備的基本技能。
下面分享一些動物實驗的常用方法:
01、復制動物模型法
此法是動物實驗最基本的方法,是采用人工的方法使動物在一定致病因素(機械、化學、生物和物理)作用下,造成動物的組織,器官或全身的一定損傷,復制成與人類疾病相似的動物疾病模型,來研究各種疾病的發生、發展規律及防治方法。
02、切開、分離法
此法是以活體動物為對象的整體實驗常用方法。習慣上把在麻醉情況下,制備一些實驗條件(如:活體解剖、分離暴露器官、組織或進行一些手術制備等措施)進行的研究稱為“急性動物實驗”。其優點是比較簡便,實驗條件相對較易控制、對研究的器官也方便直接觀察。
但存在著麻醉、手術及存活時間較短等不良因素,也會對實驗結果帶來一定的影響。因此采用此法應注意麻醉深度要適中,手術要輕巧、少出血、減少創傷,并要熟悉手術部位的神經、血管等。
03、切除和注入提取液法
常用于研究內分泌器官的生理和病理病變,如:切除某一腺體后看輻射對機體的影響、切除某一腺體后看動物出現的癥狀而推論該腺體的功能,比如蝌蚪是無甲狀腺素的,如果注入甲狀腺素,蝌蚪很快變成了蛙。
04、離體組織器官法
離體實驗是將動物的離體組織器官或生物性致病因子(微生物、寄生蟲等),置于一定的存活條件下(如:溫度、營養成分、氧氣、水、pH等)進行觀察的一種實驗方法。如:利用離體腸管觀察藥物對腸管蠕動、吸收、通透性、血流情況等的影響,并進行作用機理的分析;利用大腸桿菌或其它細菌進行藥物敏感性實驗,從而尋找抑制細菌生長的藥物,并研究其作用規律,以便為腸道感染的防治提供線索。
離體實驗的優點是方法比較簡單,一般不需要很復雜的儀器設備、實驗條件也比較容易控制,牽涉的人力較少,所以常被列為分析性研究的一種手段。不足之處是模擬的存活條件畢竟與整體的實際情況有較大的出入,其結果也往往與體內的變化有一定差距,因此可以作為整體研究的補充和參考。
05、瘺管法
用無菌手術方法給動物造成不同的人造瘺管如:胃腸道瘺管、膀胱瘺管、唾液腺瘺管、食道瘺管、膽囊瘺管等。這些瘺管可以收集內臟液體,是生理學消化研究的主要方法。此種方法是慢性動物實驗常用的方法。
慢性動物實驗一般先在無菌操作下制備好實驗模型(瘺管法是其中一種),待動物恢復健康后進行研究。這類研究方法的優點在于研究對象的機體內外環境已處于較自然且相對平衡狀態,條件比較穩定,所得的結果接近生理情況。但需要事先制備、術后護理、等動物恢復健康后才能從事實驗,花費時間較長,工作量較大,因而在選用上受到一定限制。
06、移植法
一般指將動物的器官、組織或細胞進行相互移植的一種方法。如骨髓移植時,將小鼠A(供體)的骨髓注入到小鼠B的血液中(受體),很快可見脾結節化(脾造血),而脾結節的數量反應了造血干細胞的多少,由此可以觀察干細胞的變化。
各小鼠之間的骨髓移植叫同種骨髓移植,同一品系小鼠內各小鼠之間的骨髓移植叫同系骨髓,小鼠骨髓移植給大鼠則叫異種骨髓移植。此方法也是在實驗研究中常用的。
07、生物電、活性觀察法
生物電觀察法指對動物體各種生物電用電生理記錄儀進行觀察記錄,如:心電、肌電、腦電等;活性觀察法指對動物組織中各種活動物質用生物化學法測定,如:各種酶、激素等。
08、病理解剖學、組織學觀察法
指采用肉眼觀察、光鏡和電鏡檢查,來觀察和分析動物各種疾病時病理組織的改變??蓮慕M織學的角度來探討疾病防治機理,例如:通過闌尾組織切片和肉眼觀察,分析口服中藥、針刺或局部敷藥對有炎癥闌尾的影響,闡明不同癥狀時闌尾變化的病理學特點以及某些病人用中西醫結合非手術治療后復發的原因。
近年來,由于電子顯微技術的進展,不僅可以觀察到病變時細胞內細胞器等亞細胞結構的變化,也可以運用電子掃描方法對動物器官的微小結構進行完整的表層觀察。
09、免疫學觀察法
一般指注入抗原使動物致敏,制備各種抗血清,如選用新西蘭或大白耳家兔制備病原體免疫血清、間接免疫血清、抗補體抗體血清、抗組織免疫血清等,可以采用免疫熒光技術、酶標記免疫技術、放射免疫測定技術、免疫電鏡技術等對動物免疫后各種免疫變化進行觀察。
當然,除此之外,還有其它方法如:聯體動物法,條件反射法、生物遺傳法、放射生物法、藥物化學等等。
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