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PAS染色檢測方法

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PAS染色:

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑(堿性品紅與亞硫酸氫鈉)和醛基反應使呈現紫紅色。

實驗儀器和材料

無水乙醇

二甲苯

高碘酸

偏重亞硫酸鈉

堿性品紅

蘇木素

中性樹膠

實驗步驟

1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2、高碘酸溶液處理:切片入高碘酸溶液10min,流水沖洗5min。

3、Schiff試劑處理:切片入Schiff試劑10min,流水沖洗5min。

4、蘇木素染色:切片入蘇木素染液1min,流水沖洗5min。

5、快速脫水:將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。

6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

染色結果:糖原呈紅色,細胞核藍紫色。

注意事項

染色后標本應及早觀察和記錄,染色后標本保存8天后,將逐漸褪色,保存時間延長,褪色更為明顯。

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