目的 將G0代普通型Wistar大鼠篩選并傳代,分別得到低氧敏感型和低氧耐受型G1代大鼠,初步探討G1代大鼠和普通型大鼠的低氧敏感性差異。
方法 取200只Wistar大鼠(雌雄各半)作為G0代,置于氧濃度控制系統(tǒng)中,記錄G0代大鼠在3%氧氣體積分?jǐn)?shù)下從放入至瀕死的時(shí)間(即耐低氧時(shí)間)。挑選耐低氧時(shí)間最短的30只大鼠(雌雄各半)進(jìn)行交配傳代,得到G1代低氧敏感型大鼠;挑選耐低氧時(shí)間最長的30只大鼠(雌雄各半)進(jìn)行交配傳代,得到G1代低氧耐受型大鼠。另取24只普通型Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組和模型對(duì)照組,每組12只(雌雄各半)。空白對(duì)照組大鼠置于常氧環(huán)境,模型對(duì)照組大鼠、G1代低氧敏感型大鼠(即G1敏感組)和G1代低氧耐受型大鼠(即G1耐受組)一同置入低壓低氧實(shí)驗(yàn)艙(模擬海拔5 000 m環(huán)境),12 h后檢測或觀察血?dú)狻⒀R?guī)、血生化、病理切片和低氧相關(guān)基因等指標(biāo),比較4組動(dòng)物的低氧敏感性差異。
結(jié)果 與G0代普通型大鼠相比,G1代耐受型大鼠的耐低氧時(shí)間顯著延長(P<0.01)。相比于模型對(duì)照組,G1耐受組大鼠的氧飽和度(oxygen saturation,SatO2)顯著升高(P<0.05);G1敏感組大鼠的白細(xì)胞計(jì)數(shù)(white blood cell,WBC)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(neutrophil,NEUT)、血紅蛋白濃度(hemoglobin,HGB)、紅細(xì)胞比容(hematocrit,HCT)、紅細(xì)胞分布寬度(red blood cell distribution width,RDW)、血小板計(jì)數(shù)(platelet count,PLT)和肌酐(creatinine,Cr)水平顯著升高(P<0.05或P<0.01),實(shí)際碳酸氫鹽(actual bicarbonate,AB)含量顯著降低(P<0.05),腦系數(shù)和肺系數(shù)顯著升高(P<0.05)。此外,病理切片結(jié)果顯示模型對(duì)照組、G1敏感組和G1耐受組大鼠的腦組織和肺組織均受到明顯損傷,且3組大鼠腦組織中低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管內(nèi)皮生長因子A(vascularendothelial growth factor A,VEGFA)基因的表達(dá)水平無顯著差異(P>0.05)。
結(jié)論 相比普通型大鼠,G1代低氧敏感型/耐受型大鼠表現(xiàn)出良好的低氧敏感/耐受性狀趨勢(shì),但仍需通過不斷近交篩選傳代來純化并穩(wěn)固性狀。
閱讀原文:低氧敏感和低氧耐受型Wistar大鼠篩選及其G1代的低氧敏感性初探.pdf