一.實(shí)驗(yàn)方法:
方法一:LPS加煙熏造模動(dòng)物模型
香煙煙熏,每天2次,每次10根煙,每周熏6天。第1天、第15天、第29天及第43天氣管內(nèi)滴注脂多糖(用量1 mg/kg)時(shí)不予煙熏,造模8周。
成功方法二:煙熏
香煙煙熏,每天2次,每次10根煙,每周熏6天。連續(xù)誘導(dǎo)6個(gè)月。
二.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1HE染色顯微鏡觀察可見(jiàn)氣道上皮細(xì)胞纖毛脫落倒伏,部分出現(xiàn)鱗狀化生;終末小氣道管腔內(nèi)較多炎性分泌物阻塞氣道;氣道管壁明顯增厚,膠原蛋白沉積增多;肺大皰和肺氣腫形成;肺泡腔內(nèi)可見(jiàn)吞噬煙塵顆粒的巨噬細(xì)胞集落。
2.2COPD組:各級(jí)支氣管黏膜上皮細(xì)胞變性、壞死、增生,纖毛倒伏、部分脫落,黏液分泌增加,杯狀細(xì)胞增多;肺實(shí)質(zhì)呼吸性支氣管及肺泡破壞、斷裂,部分融合形成肺大泡;肺間質(zhì)明顯增生,炎癥細(xì)胞廣泛浸潤(rùn)。
病理評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):在每個(gè)視野正中心劃十字交叉線,計(jì)算與交叉線相交的肺泡間隔數(shù)(Ns)和每個(gè)視野內(nèi)肺泡數(shù)(Na),同時(shí)測(cè)量十字線總長(zhǎng)(L)和每個(gè)視野面積(S)。
根據(jù)以下公式計(jì)算肺組織平均內(nèi)襯間隔(MLI)和平均肺泡數(shù)(MAN)∶MLI=L/Ns(其數(shù)值反映肺泡平均直徑)、MAN=Na/S(其數(shù)值反映肺泡密度)。肺泡破壞指數(shù)(Destructiveindex, DI)的測(cè)定參照陳燕等[6]的方法進(jìn)行:每只小鼠取3個(gè)HE 染色切片,每張切片低倍鏡( 切片,每張切片下至少觀察20個(gè)非重復(fù)視野,分別以正常(N)或破壞(D)記錄肺泡結(jié)構(gòu)的破壞情況,要求每一例各切片的N、D值總和≥總和泡結(jié)"改為3000,以公式計(jì)算DI=D/(D+N)×100。