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　　大小鼠給藥是動物實驗里非常重要的一環(huán)，單就給藥方式而言，就有多種選擇，如口服、灌胃、靜脈注射、腹腔注射、皮下注射、肌肉注射、腦室內(nèi)注射、鼻腔或舌下給藥等;如何科學(xué)合理的選擇給藥方式，是一門大學(xué)問!本期，小編就為大家介紹下常見的給藥方法，分享一些實用的操作技巧，希望能夠幫助掙扎在動物實驗一線的小伙伴們少走彎路。

　　注射器選擇

　　工欲善其事必先利其器，市面上的注射器五花八門，針對不同的給藥途徑，我們首先要選擇合適的注射器和針頭。

　　Figure 1. A) Needle and B) syringe parts, labeled. C) Burr on needle caused by repeated placement of the needle into a multi-use vial. D)Needle recapper in use.

　　注射器及針頭的選擇和使用

　　1.針有尖、斜面、軸和輪轂，注射器有一個針頭、一個桶和一個柱塞(Fig1. A、B);針頭連接到注射器的頂端，有些注射器有鎖頭，請確保針頭穩(wěn)定的連接在注射器上。

　　2.針是按規(guī)格和長度來定大小的。量規(guī)數(shù)越大，針越小。小針很容易變鈍(針尖上形成毛刺)不應(yīng)該用來刺破多劑量瓶(Fig1.C)。插入動物時針口最好斜面向上，特別是靜脈注射。

　　3.如果不熟悉使用注射器和針頭，在注射動物之前先練習(xí)使用注射器和注射。理想情況下，操作者將能夠自信地用一只手操作注射器和針頭，而另一只手來約束動物。手部穩(wěn)定可以減少針的移動，減少組織損傷。

　　4.水性藥劑比油性化合物等較厚的藥劑更容易注入。注射較濃的化合物時要非常緩慢，以避免針頭從注射器中脫落。

　　5.不要用手重覆針頭，這是被針頭刺傷的常見原因。針頭和注射器應(yīng)妥善放置在有標記的利器盒內(nèi)。如果針頭必須重新使用，可以使用類似設(shè)備(Fig1.D)。

　　口鼻給藥

　　Intranasal (IN)

　　1.按正確方式進行抓取。

　　2.使用注射器或吸管，將少量藥劑滴于動物的鼻孔處。

　　3.注意藥劑會消失在鼻孔里。

　　4.重復(fù)上述操作，直到所需的量完成為止。

　　肌肉注射

　　Intramuscular (IM)

　　1.正確抓取動物，確保動物的一個后腿是自由的，穩(wěn)定的注射。抓握可能需要兩個人，如果動物在注射過程中會踢腿，針就會造成肌肉損傷。

　　2.針應(yīng)該垂直于動物的皮膚插入。使用適當(dāng)大小的注射器和針頭，將材料注射到動物的股四頭肌(大腿前部)或大腿外側(cè)肌肉群，插入深度沒過針的斜面。

　　3.不要注射到后面的肌肉群，因為可能會損傷坐骨神經(jīng)。

　　4.如果動物要接受多次IM注射，要雙腿交替。

　　腹腔注射

　　Intraperitoneal (IP)

　　1.正確抓取動物，將動物的鼻子朝向地面，露出腹部注射。

　　2.定位動物的中線并將腹部分成象限(Figure 2.)，下象限，特別是動物的右下象限，是腹腔注射的合適位置(選擇右下象限是因為缺少重要的解剖結(jié)構(gòu))。

　　3.使用適當(dāng)大小的注射器和針頭，將材料注射到動物體內(nèi)。

　　4.如果動物要接受多次IP注射，應(yīng)交替注射部位。

　　Figure 2. Quadrants of the ventral abdomen. Only inject into the lower two quadrants, preferentially the right lower quadrant.

　　皮下注射

　　Subcutaneous (SC,SQ)

　　1.正確抓取動物，動物必須受到足夠?qū)捤傻淖ノ眨@樣皮膚才能活動起來。

　　2.如果動物是在SC注射后常規(guī)處理，不要使用頸背(頸背)。相反，可以使用背部或側(cè)面的皮膚。如果動物要接受多次皮下注射，可交替注射部位。

　　3.把皮膚輕輕地向上拉，做一個“帳篷”。

　　4.使用適當(dāng)大小的注射器和針頭，以30°-45°角將針頭插入帳篷狀皮膚，然后注射藥劑。平行地從手指處注射，手指向上支撐皮膚。

　　5.如果注射成功，可以看到皮下有一個小腫塊。注射后，溫和的給以壓力，以防止藥劑回流。

　　皮內(nèi)注射

　　Intradermal (ID)

　　1.對于皮內(nèi)注射，需要給動物剃毛，這樣可以看到皮膚。

　　2.抓握動物進行多次皮內(nèi)注射很困難，這種情況下，需要化學(xué)鎮(zhèn)靜。ID的注射位置與SC的注射位置相同。以15°-30°角將一根大小合適的針插入皮膚。針不要插得很深，注射時應(yīng)該有阻力。

　　(另一種方法是輕輕按壓注射部位附近的皮膚，以非常淺的角度插入針頭。這種方法對小鼠很有用，因為它可以防止老鼠在注射過程中移動。)

　　3.如果注射成功，會看到一個小水泡，并且比周圍的皮膚白。

　　4.注射后，溫和的給以壓力，以防止藥劑回流。

　　血管內(nèi)注射

　　Intravascular (IV)

　　1.左右側(cè)尾靜脈是小鼠和大鼠最常見的血管通路。

　　2.其他血管通路在小鼠和大鼠中也是可以注射的，但一般需要鎮(zhèn)靜和注射后鎮(zhèn)痛。

　　3.對于尾靜脈注射，可使用保定袋或約束裝置輔助操作(使用方法點擊此處)。

　　4.把動物的尾巴放在燈下，或放在一個有保護的加熱裝置上。這將促進血管舒張，注射更容易。(注意不要讓動物過熱;對于大的雄性大鼠來說，清理掉尾巴上的皮膚鱗片可以清楚地看到靜脈。清潔時要輕柔，避免擦傷皮膚。)

　　5.用左手抓住動物的尾巴尖，這樣可以把尾巴拉直。

　　6.90°旋轉(zhuǎn)尾部，尾靜脈注射更容易。(這種動物有兩條側(cè)尾靜脈和一條腹側(cè)尾動脈Figure 3.)

　　7.用針以15°-20°角從尾巴的遠端開始接近尾巴。(靜脈很淺，插入深度不宜超過斜面太多，注射開始盡可能遠離根部，如果第一次嘗試失敗，這樣有更多的未受損靜脈用來嘗試注射。)

　　8.進行注射，成功的插入注釋時是沒有阻力的，并且注射部位變蒼白。(注射前不要抽吸，因為這會使靜脈衰竭，注射后輕柔按壓靜脈穿刺部位可防止出血。)

　　9.如果注射不成功，藥劑將不容易推動，相反，尾部皮膚會變白。

　　Figure 3. Schematic of the tail in cross-section, illustrating the relationship of the arteries and veins to the bony and tendenous structures.

　　灌胃

　　Intragastric (IG)

　　1.只能夠?qū)Ρ蛔ト〉摹⑶逍训膭游镞M行灌胃，麻醉或鎮(zhèn)靜會增加誤吸的風(fēng)險(物質(zhì)無意中進入肺部)。

　　2.選擇一個適當(dāng)大小的口服灌胃針，這種針的末端是球狀的，便于防止它們進入氣管。

　　3.所需的長度應(yīng)需要從舉起動物的嘴角開始測量(Figure 4.)，灌胃針的球頭應(yīng)達到動物最后一根肋骨(針規(guī)由動物的體重決定)。

　　4.把動物的頭和身體控制在一條直線上。這樣可以拉直食道，使進食管更容易通過。

　　5.將針的球形尖端插入動物的嘴里，蓋住舌頭。針頭就位后，把針頭和注射器拿起來，輕輕壓在上顎上，讓動物的鼻子朝向天花板。(在大鼠身上，當(dāng)針頭穿過喉嚨后部時，可能需要稍微改變方向，針上的任何阻力都表明需要調(diào)整位置。)

　　6.繼續(xù)穿針，直到達到預(yù)定的距離。針應(yīng)容易通過，動物不應(yīng)喘息或窒息。

　　7.注射藥物，它應(yīng)該流入胃部。如果有抵抗或動物喘息，窒息，或動物變成青紫色，應(yīng)立即停止操作把針拔掉，情況嚴重需安樂死。

　　Figure 4. Gavage needle sizing in rats. A) Gavage needle too long. B) Appropriately sized gavage needle. C) Gavage needle measurement tooshort, D) Palpating for the last rib to determine appropriate gavage needle size.

　　溫馨提示

　　給藥途徑會影響藥物的吸收、生物利用度和特定實驗的適宜性。研究人員需熟悉各種途徑，以最佳方式對動物進行給藥。例如，如果研究人員希望以一種較慢的方式給藥，就不應(yīng)該使用促進物質(zhì)快速吸收的途徑，如靜脈或腹腔。

　　給實驗室嚙齒動物使用藥物，應(yīng)考慮適當(dāng)?shù)脑O(shè)備尺寸和藥物體積(Table 1.)。設(shè)備尺寸不當(dāng)或體積過大可能導(dǎo)致動物不適、受傷或死亡。一般情況下，非腸道給藥是無菌的，除非研究目的使之。

　　Table 1. Recommended doses and needle sizes for various routesof compound administration in mice and rats.

　　化合物和生物制劑應(yīng)放在對動物影響最小的溶質(zhì)或載體中。通常被廣泛使用的pH值為生理pH值(7.3 -7.4)，尤其是在皮下、肌內(nèi)和腹腔內(nèi)使用時。通過這些途徑給藥的物質(zhì)中的非生理pH值可能導(dǎo)致疼痛、壞死和組織損傷。更大范圍的pH值可通過胃內(nèi)和靜脈途徑耐受。

　　在小型嚙齒類動物中，另一個重要的考慮因素是，如果提供大量的室溫液體，注意不要冷卻。如果液體是通過靜脈或腹腔注射的，特別是為了支持生病的動物，它們應(yīng)該被加熱到體溫(37℃)。

　　動物相關(guān)操作程序的培訓(xùn)對研究的成功至關(guān)重要。為了進行大多數(shù)的實驗，動物必須由專業(yè)人員來處理，動物處理得越好，動物的壓力就越小。處理壓力已經(jīng)被證明會影響某些類型的研究，使動物適應(yīng)溫和的人際接觸，可以減輕動物的壓力，使動物更容易馴養(yǎng)。

　　上海南模生物已建立多種手術(shù)或藥物誘導(dǎo)的經(jīng)典的人類疾病大小鼠模型，可為相關(guān)疾病發(fā)病機制的研究、基因或蛋白在疾病中的功能研究、疾病藥物篩選與療效評價等提供良好的動物模型。

　　聲明：文中圖表均來源于JOVE Video Article：Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats