目的 探究斑馬魚胚胎早期發育過程中Micall2a基因的表達模式,以及該基因對斑馬魚血管發育的影響。
方法 使用Tg (fli:GFP) 轉基因斑馬魚 (用綠色熒光蛋白標記血管) 和野生型斑馬魚 (AB),采用全胚胎原位雜交 技術檢測其早期胚胎不同發育階段的Micall2a基因表達水平。通過顯微注射嗎啉反義寡核苷酸下調Micall2a基因, 并采用實時熒光定量PCR技術檢測該基因在斑馬魚胚胎不同發育階段mRNA表達水平。采用激光共聚焦顯微成像 技術,觀察并分析 Micall2a基因下調后斑馬魚的血管表型變化。
結果 受精后 24 h (24 hours post-fertilization, 24 hpf)、36 hpf和48 hpf的斑馬魚早期胚胎的腦、心臟、血管系統中均有Micall2a基因表達。顯微注射嗎啉反義寡 核苷酸后 Micall2a 基因的 mRNA 水平增加,抑制斑馬魚胚胎的血管發育,導致斑馬魚節間血管發育缺陷。
結論 Micall2a基因表達下調可以抑制斑馬魚血管的發育。
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